貨號：K-CellG5

中文品名：纖維素酶檢測試劑盒[CellG5法]

品名：Cellulase Assay Kit (CellG5 Method)

規格1：K-CellG5-4V 120/240次(手工)/480次(自動分析儀)
規格2：K-CellG5-2V 60/120次(手工)/240次(自動分析儀)

說明：CellG5檢測試劑盒用于檢測纖維素內切酶（1,4 -β-葡聚糖內切酶）包含兩種組分：1) 4,6-O-(3-Ketobutylidene)-4-nitrophenyl-β-D-cellopentaoside (BPNPG5) 和 2)熱穩定的β-葡萄糖苷酶。 酮阻斷基團可阻止β-葡萄糖苷酶對BPNPG5的水解。通過纖維素內切酶的培養可生成非阻斷的顯色寡糖，被β-葡萄糖苷酶迅速水解。產生4-硝基苯酚的速率與β-葡萄糖苷酶水解BPNPG5直接相關。加入Tris緩沖液(pH 9.0)后可終止反應，并形成苯酚顯色產物。
CellG5檢測法代表了代表了纖維素酶測量方法的巨大進步。傳統的纖維素酶檢測依賴于酶底物，例如羧甲基纖維素，微晶纖維素，纖維低聚糖，CMC濾紙，染色多糖，包括CMC剛果紅或纖維素天青。

應用：纖維素酶檢測試劑盒[CellG5法]。

原理：

比色法測定酶制劑、發酵產品中1,4 -β-葡聚糖內切酶（纖維素酶）的含量。

檢測方法：分光光度法 @400 nm

反應時間：10min

檢測限：3.5 x 10^-4 U/mL

應用案例：

發酵液，工業酶制劑和生物燃料研究。

方法識別：

新方法

試劑盒組成：

Bottle 1: (x2) 或 (x4)	每瓶含有4,6-O-(3-Ketobutylidene)-4-nitrophenyl-β-D-cellopentaoside (BPNPG5)溶于3毫升含有0.02% w/v疊氮鈉的10% DMSO水溶液。
-20°C下穩定超過4年。
Bottle 2: (x 2)	熱穩定的β-葡萄糖苷酶(0.50 mL, 600 U/mL)溶于含有0.02% w/v疊氮鈉的 50% w/v 硫酸銨溶液。
4°C下穩定超過4年。
Bottle 3:	木霉纖維素酶標準溶液 (5 mL, ~ 3 U/mL; 準確至見瓶標簽) 溶于含有0.02% w/v疊氮鈉的50% 的丙三醇水溶液。
-20°C下穩定超過4年。

優點：

所有試劑可穩定超過4年
價格非常具有競爭力
完全針對纖維素酶（1,4-葡聚糖內切酶)
常規操作，非常靈敏
檢測方法十分簡單，適合儀器分析
包含標準

參考文獻：

Novel substrates for the measurement of endo-1,4-β-glucanase (endo-cellulase). McCleary, B. V., Mangan, D., Daly, R., Fort, S., Ivory, R. & McCormack, N. (2014). Carbohydrate Research, 385, 9-17.

Quantitative fluorometric assay for the measurement of endo-1,4-β-glucanase. Mangan, D., McCleary, B. V., Liadova, A., Ivory, R. & McCormack, N. (2014). Carbohydrate Research, 395, 47-51.

A novel automatable enzyme-coupled colorimetric assay for endo-1,4-β-glucanase (cellulase). Mangan, D., Cornaggia, C., McKie, V., Kargelis. T. & V. McCleary, B. V. (2016). Analytical and Bioanalytical Chemistry, 408(15), 4159-4168.